徠卡熒光顯微鏡的正確使用

徠卡熒光顯微鏡需要在爬宜內(nèi)進(jìn)行觀氏否則圍有其他光線而影響觀察的正確性。

徠卡熒光顯微鏡的產(chǎn)生是由于某些物質(zhì)核輻射線波長較短的光線照射后即發(fā)出波長較長的可見兒有的物質(zhì)或細(xì)胞本身并不產(chǎn)生熒光，但在有機(jī)3E光色紫溴潤下即能產(chǎn)生榮光。

徠卡熒光顯微鏡觀察方法可分為兩種：

（1）陸視場照明法

將紫外光照明器前面的全部濾光片用上，這時(shí)汞氣燈所發(fā)射的全部可見光被濾九而蹬過的紫外九其波長約為3000人一s600A此乃正常的熒光觀察法。

（2）深藍(lán)視場照明法

徠卡熒光顯微鏡將靠近紫外光照明器光源的兩組濾光片用2，這時(shí)把汞氣燈發(fā)生的光波限制征一定的波長內(nèi)（3000A一4500A），視場內(nèi)有深藍(lán)色的背景出現(xiàn)，是為求得足夠強(qiáng)度的紫外光照明標(biāo)本。

徠卡熒光顯微鏡為了使照明標(biāo)本的紫外光線不進(jìn)入觀察看的眼睛，以免損壞眼睛和影響熒光觀察的正確性起見在物鎬與目鏡之間安裝有兩組濾光片，并可配合組成各種顏色，使用時(shí)極為方便．

在使用徠卡熒光顯微鏡叭皮把定距尺安裝在紫外光照明器與顯微鏡之間，以保持照明器的正確位置。

徠卡熒光顯微鏡也可安裝白識燈照明器，燈泡為6Y15w之白識燈，其插頭皮與變壓器上白熾燈頭插座相連接。

徠卡顯微鏡作熒光觀察時(shí)，標(biāo)本所用的載物比采用石英裁物小當(dāng)無石英載物片時(shí)，亦可采用普通玻璃裁物片，因普通玻璃對較長波段之紫外光吸收并不多。

徠卡熒光顯微鏡的高壓汞氣燈一經(jīng)熄滅，要等到汞氣燈冷6g后才可重新發(fā)光因而在進(jìn)行連續(xù)觀察分橋時(shí)，不應(yīng)中途滅燈，以免浪費(fèi)時(shí)間。策外光照明器必須通過變壓33才能使用。’

徠卡熒光顯微鏡的光源裝置

光源裝置是徠卡熒光顯微鏡的主要部分，它的作用是提供足夠強(qiáng)度的激發(fā)光，現(xiàn)代俊光顯微鏡基本上采用超高壓汞奴光源裝置，它由電源箱印燈空兩部分組成。超高壓汞燈的發(fā)光，是電極間放電使水銀分子在不斷解離和還原過程中發(fā)出量子的結(jié)果，徠卡熒光顯微鏡具有固定的光譜曲線，在紫外和紫藍(lán)部分都有很強(qiáng)的發(fā)射，足以激發(fā)各類熒光物質(zhì)，這是它被普通采用作為熒光顯微鏡光源的主要原因。一般都采用200W的超高壓汞燈作光涌，其使用平均壽命約200小時(shí)左右。

徠卡熒光顯微鏡由于超高壓汞燈的電壓很高（紉EoDOV），另外貿(mào)外線也很酞因A，燈泡裝置在燈室中的后5，以肪傷害眼賄．

徠卡熒光顯微鏡城色系統(tǒng)

濾色系統(tǒng)是徠卡熒光顯微鏡的重要部分，它由激發(fā)濾片（*相片）和抑制濾片（第二濾只）所組成。前者提供一定波長范目的激發(fā)光，后者提供相應(yīng)波長范圍的熒光。其蹈片通常用有色玻璃組成。其型號各國均不相同。

徠卡熒光顯微鏡激發(fā)濾片根據(jù)光源和熒光色突的特點(diǎn)，可分為露外光激發(fā)濾片，紫氏光激發(fā)濾片和紫外藍(lán)光激發(fā)濾片。

徠卡熒光顯微鏡援外激發(fā)濾序可隨波長400微米以下的紫外光透過，400毫微米以上的可見光擋住。常用型號為ZWBl或zwB3，外加一塊BG38以除去ZWBl或zWE3的紅色尾波。

徠卡熒光顯微鏡紫族色激發(fā)財(cái)挪服波長350一390微米范圍內(nèi)的光透過。常用型號為QB24。紫外政光激發(fā)濾片可控波長300一450微米范圍內(nèi)的光逮過。常用型號為ZE2或zB3，外加HG38，韋·些熒光色素，其zui大吸收峰在500微米以上酌．也可以用論綠濾J4BG7激發(fā)。近輕改隨著金屬鍍膜陵木的發(fā)展，巴開始采用選擇性更強(qiáng)的金屬膜干涉濾片，由于它調(diào)對性強(qiáng)，波長適當(dāng)，因而激發(fā)效果比有色玻璃片更好。

徠卡熒光顯微鏡所需激發(fā)濾片的厚度，主要根據(jù)所用顯微木激發(fā)方式而定，暗場熒光顯微術(shù)要求激發(fā)濾片薄一些，明場時(shí)則要求厚一生因?yàn)槭褂冒祱鰰r(shí)，激發(fā)光不理按進(jìn)入物鏡，另外還得考慮標(biāo)本情況和目的性，基本原則是以獲得昆明亮的熒光相的背景襯托為準(zhǔn)。

徠卡熒光顯微鏡抑制濾片的選擇，主要根據(jù)激發(fā)濾只而定。其原則是以*吸收激發(fā)光為晚即與激發(fā)明計(jì)重疊應(yīng)該；下透過任何可見光（*互補(bǔ)）以保護(hù)眼睛不受紫外光的刺激和損害。為與激發(fā)濾片相對應(yīng)，抑制濾片也可分為：紫外光抑制濾片、紫藍(lán)光抑制濾片和紫外驗(yàn)光抑制濾址。

徠卡熒光顯微鏡的本體

顯微鏡是任何徠卡熒光顯微鏡的基本工具，它的主要作用是使被撿標(biāo)本圖象得到不同程度的放大。在熒光顯微木中，熒光光源裝置是提供一定波長的激發(fā)光使被校標(biāo)本受激發(fā)射熒光，再通過顯微鏡的物鏡，B鏡系統(tǒng)使熒光圖象放大以供觀察，因此，一般來說，任何顯微鏡都可以用于熒企顯微術(shù)。不玖由于熒光顯檄鏡所放大的象是熒光圖象，必須根據(jù)熒光產(chǎn)生和表現(xiàn)的特點(diǎn)，因此在使用方法—L略有講災(zāi)。

一船徠卡熒光顯微鏡的光學(xué)元件，大都果用普通光學(xué)玻璃制造。它們對30ooA以上的長波紫外線和可見光能很好地透過，因此完滿足——殷熒光顯微術(shù)的要求，只是在個(gè)別情況下，當(dāng)標(biāo)本必須用短波紫外線激發(fā)時(shí)，才需用石英玻璃或特種玻璃的聚光鏡和反射執(zhí)這時(shí)殘破片也必須是特制晰但在進(jìn)射光顯檄術(shù)時(shí)，物鏡和目鏡只需用普通光學(xué)玻璃即可。如在反射光顯微術(shù)時(shí)，則物鏡必須能透過紫外光的。現(xiàn)就熒光顯微木的特點(diǎn)，介紹一下熒光顯微境備部分的性能特點(diǎn)。

備注：徠卡熒光顯微鏡的使用方法部分新聞由http://www.cnnoptics.com/，編輯上傳。