尼康顯微鏡-暗視野顯微鏡法
原理;暗視野顯微鏡與明視野顯微鏡的區(qū)別是光線照射的方法不同。暗視野顯微鏡有一個(gè)暗視野集光器(圖1—4),其中央有一個(gè)不適光的黑板遮擋,直射光線*不能進(jìn)入物鏡,僅可從其邊緣射到載玻片的標(biāo)本上。因?yàn)楣饩€不能直接進(jìn)入鏡筒,所以視野背景是暗的。這樣就可在暗視野中看到明亮的物像。
材糯;1.菌種:變形桿菌、葡萄球菌幼齡(8—12小時(shí))肉場(chǎng)培養(yǎng)物。
2.蓋玻片、薄載玻片(1.5mm以下)、暗視野集光器、虹彩光闌或持制泊鏡頭、強(qiáng)光燈。
方法;1.在普通光學(xué)顯微鏡上換裝暗視野集光器,使其頂面距載物臺(tái)o.5cm,并加一滴香柏油。
2.卸下油鏡頭,添加一虹彩光閑或換以附有縮放光聞的特制油鏡頭。
3.取2環(huán)菌液,放于載玻片上,加上蓋玻片。放在載物臺(tái)上,仔細(xì)上升集光器,使油滴與載玻片下表面接觸,嚴(yán)防油滴中有氣泡。
4.轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使光線集中于暗視野集光器上.用低倍鏡觀察。當(dāng)視野中有一圓形光環(huán)出現(xiàn)時(shí).轉(zhuǎn)動(dòng)集光器上的調(diào)節(jié)器,將光環(huán)移于視野中心。
5.另加一滴香柏油于蓋玻片上,用泊鏡檢查。
結(jié)果;在黑暗的背景中能看發(fā)亮的茵體。
尼康顯微鏡-暗視野顯微鏡法
注意事項(xiàng)
1.集光器與載玻片之間一定要被香柏油充滿,否則照明光線會(huì)在集光器上面進(jìn)行全面反射,從而得不到黑暗背景。
2.集光器的光袖與物鏡的光抽要嚴(yán)格碉在一直線上,使集光器焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)標(biāo)本。
3.載破片和蓋玻片一定要薄,要潔凈。
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