熒光顯微鏡簡介
熒光顯微鏡是用短波長的光線照射用熒光家染色過的被檢物體,使之受激發后而產生長波長的熒光,然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應用于生物、醫學等領域。
(一)透射式
激發光來自被校物體的下方,聚光鏡為暗視野聚光鏡,以便激發光不進入物鏡,而熒光進入物鏡。此類顯微鏡在低倍情況下明亮,高倍則暗,因而在泊浸鏡調節時較難操作,尤以低倍鏡的照明范圍難于確定,但能得到很暗的視野背景。透射式不使用于非透明的被檢物體。
(二)落射式
透射式目前幾乎被淘汰,新型的熒光顯微鏡多為落射式。光源來自被檢物體的上方,在光路中具有分光鏡,所以對透明和不適明的被檢物體都適用。由于物鏡起了榮光鏡的作用,不僅便于操作,而且從低倍到高倍,可以實現整個視場的均勻照明。
(三)使用注意事項
(1)激發光長時間的照射,會發生熒光的衰減和淬滅現象,因此盡可能縮短觀察時間,暫時不觀察時,應用擋板遮蓋激發光。
(2)作油鏡觀察時,應用“無熒光油”。
(3)熒光幾乎都較弱,應在較暗的室內進行。
(4)電源裝穩壓器,否則因電壓不穩不僅會降低汞燈的壽命效果。
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