徠卡熒光顯微鏡的光源裝置及濾色系統
光源裝置是徠卡熒光顯微鏡的主要部分,它的作用是提供足夠強度的激發光,現代熒光顯微鏡基本上采用超高壓汞燈光源裝置,它由電源箱和燈室兩部分組成。超高壓汞燈的發光,是電極間放電使水銀分子在不斷解離和還原過程中發出量子的結果,它具有固定的光譜曲線,在紫外和紫藍部分都有很強的發射,足以激發各類熒光物質,這是它被普通采用作為徠卡熒光顯微鏡光源的主要原因。一般都采用200W的超高壓汞燈作光涌,其使用平均壽命約200小時左右。
由于超高壓汞燈的電壓很高(約15000V),另外紫外線也很強,燈泡裝置在燈室中的后方,以防傷害眼睛。
徠卡濾色系統
濾色系統是徠卡熒光顯微鏡的重要部分,它由激發濾片(*濾片)和抑制濾片(第二濾片)所組成。前者提供一定波長范圍的激發光,后者提供相應波長范圍的熒光。其濾片通常用有色玻璃組成。
徠卡激發濾片根據光源和熒光色素的特點,可分為紫外光激發濾片,紫藍光激發濾片和紫外藍光激發濾片。
近年來,隨著金屬鍍膜技術的發展,已開始采用選擇性更強的金屬膜干涉濾片,由于它調對性強,波長適當,因而激發效果比有色玻璃片更好。
所需激發濾片的厚度,主要根據所用徠卡顯微術激發方式而定,徠卡暗場熒光顯微術要求激發濾片薄一些,明場時則要求厚一些,因為使用暗場時,激發光不直接進入物鏡,另外還得考慮標本情況和目的性,基本原則是以獲得zui明亮的熒光和的背景襯托為準。
抑制濾片的選擇,主要根據激發濾片而定。其原則是以*吸收激發光為準,即與激發濾片重疊應該不透過任何可見光(*互補)以保護眼睛不受紫外光的刺激和損害。為與激發濾片相對應,抑制濾片也可分為:紫外光抑制濾片、紫藍光抑制濾片和紫外藍光抑制濾片。