熒光顯微鏡概述
熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡不同,它不是通過普通光源的照明觀察標本,而是利用一定波長的光(通常是紫外光或藍紫光)激發顯微鏡下標本內的熒光物質,使之發朗熒光,呈現熒光映像。所以,熒光顯微鏡的光源所起的作用不是直接照明,而是作為一種激發標本內的熒光物質的能源。我們之所以能觀察標本,不是由于光源的照明,而是標本內熒光物質吸收激發光的光能后所呈現的熒光映像。
由此可如,熒光顯微鏡的特點,主要是它的光源能供結大量特定波長范圍的激發光,使受檢標本內的熒光物質能獲得必要強度的激發光。同時,熒光顯微鏡必須具有相應的濾片系統。一組濾片安裝在激發光源和顯微鏡之間的光路中,它們可選樣性地使激發光源的特定波長范圍的光通過,作為激發光,這種濾片稱為激發濾片。一組濾片安裝在目鏡和物鏡之間的光路中,這組濾片允許熒光通過,但吸收視野內未轉化為熒光的激發光,從而保護觀察吝的眼睛。這種濾片稱為阻斷濾片或吸收濾片。
此外,還有吸熱底片和吸收紫外線濾片,吸收光源的熱量和吸收紫外光允許可見光通過。這兩種濾片也安裝在光源和顯微鏡之間的光路中。后者吸收紫外光允許可見光(白光)通過,這樣使茨光顯微鏡可作為普通顯微鏡使用。由于熒光顯微鏡光源的光度強,一般均附有不同強度的小性灰濾片,可減弱光源約強度。團此,熒光顯微鏡包括光源、濾片系統和顯微鏡三個部分(圖3)。
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