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倒置顯微鏡是一種把照明系統(tǒng)望于載物臺(tái)的上方,把物鏡置于載物臺(tái)下方的顯微鏡。這種顯微鏡出于大大加長了載物臺(tái)上放置樣品的高度,使得可以放置培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶等容器,因此能夠觀察活體細(xì)胞和組織,這一點(diǎn)對其他顯微鏡來說是無能為力的。
圖12.1是一臺(tái)倒置顯微鏡,下面就主要部件的特殊構(gòu)造和性能分別加以敘述。
1.照明系統(tǒng)例置顯微鏡的照明系統(tǒng)是比較特別的,它借助于照明架和照明器座被固定在載物臺(tái)上方,照明器座在照明架上的位置隨著所使用的集光器類型而不同。照明器座上具有濾片槽,用于相差觀察的相環(huán)楷和一個(gè)光鬧,它的上面可以安裝照明器,下面可以安裝長工作距離集光器。倒置顯微鏡所使用的照明器一般為6V15W簡式照明器或12v50w燈空,后者可以產(chǎn)生更強(qiáng)的照明光。兩種照明器部具有調(diào)中螺旋,可以進(jìn)行燈的調(diào)個(gè)。一般例置顯微鏡通常使用這種透射光照明器,但較為的倒置顯微鏡還配備有落射光照明器(圖12.2)。這種照明器安裝在朗臺(tái)的后側(cè)方,照明光線通過物鏡由下方落射在標(biāo)本上,我們可以借助標(biāo)本的反射光而觀察物體的表面結(jié)構(gòu)及立體形狀,因此更適于觀察活體微生物、懸浮細(xì)胞,也適用于觀察巖石、礦物、晶體標(biāo)本及金屬材料和部件的表面。
2.集光器
在倒置顯微鏡中經(jīng)常使用的集光器有兩種:
(1)長工作距離集光器。這種集光器可以直接旋入照明座下面,它使得集光器與載物臺(tái)之間有較長的距離,可以放置培養(yǎng)瓶進(jìn)行觀察,它主要適用于用低倍物鏡觀察較大容器內(nèi)的物體。使用這種類型的集光器時(shí),照明器座上的光闌是作為孔徑光闌而使用的,場深和顯微鏡像的反差可以用這個(gè)光闌來調(diào)節(jié)。
(2)系統(tǒng)策光器。這種集光器借助于一個(gè)集光器架安裝在照明架的楔形道軌內(nèi),并且通過垂直調(diào)動(dòng)旋鈕可以上下移動(dòng)聚焦,它的基部具有集光能力較低的集光器透鏡,面具有不同孔徑和工作距離的可更換策光船頂,并且有7L徑光陰。使用這種集光器時(shí)采用柯勒照明法,照明器座上的光闊就作為視場光闌使用。當(dāng)集光器正確放置時(shí),一個(gè)清楚的光闌像就會(huì)在物體平面形成,從而可以按照視場的大小進(jìn)行調(diào)節(jié)。
3.物鏡
由于用例置顯微鏡觀察的話體生物標(biāo)本往往部是裝在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶等玻璃容器內(nèi)的,必須透過較厚的玻璃容器底進(jìn)行觀察,因此用于倒置顯微鏡的物鏡必須有較長的自由工作距離(6.4一11mm),表13中列出了在倒置顯微鏡中常用的各種物鏡及其性能和用途。
用倒置顯微鏡也可以觀察具咨0.17mm厚蓋玻片的一般組織切片和涂片,但必須把玻片倒放(即蓋玻片向下)在物臺(tái)上,在這種情況下一般的透射光物鏡直至油浸物鏡都可以使用。
在倒置顯微鏡中,它的光袖由于通過一系列棱鏡被偏轉(zhuǎn)了135°,因而使得如同一般的顯微鏡一樣能夠從向前傾斜45°的目鏡筒上很方便地進(jìn)行觀察。在毛些類型的這種顯微鏡中是以橫向位置進(jìn)行操作的,因而操作比較零活和方便,左手握著后面的粗調(diào)和細(xì)調(diào)旋鈕,右手驅(qū)動(dòng)物臺(tái)機(jī)械移動(dòng)器的旋鈕,或者直接移動(dòng)裝有樣品的容器。
倒置顯微鏡可以裝配備種附屬裝置做多種用途使用,例如進(jìn)行暗視野觀察、相差顯微觀察、落射光顯微觀察、熒光顯微觀察以及顯微照相、測繪和投影。如果把例置顯微鏡放在自動(dòng)恒溫臺(tái)上并蓋上有機(jī)玻確保溫罩(圖12.3),就可以在恒溫條件下對培養(yǎng)的話體組織和細(xì)腦進(jìn)行鉸長時(shí)間的定點(diǎn)動(dòng)態(tài)現(xiàn)察和照相,還可以裝上顯微電影攝影機(jī)拍攝縮時(shí)電影,每隔一定的時(shí)間拍攝一格,這樣把發(fā)生在校長時(shí)間內(nèi)我們不易察覺的微觀生命活動(dòng)現(xiàn)象(如細(xì)胞分裂、生長、微生物的運(yùn)動(dòng)等過程)真實(shí)地記錄下來,而在較短的時(shí)間內(nèi)把這一過程再現(xiàn)在銀幕上,為我們進(jìn)行動(dòng)態(tài)的生物學(xué)研究提供了絕妙的工具。
表13倒互顯微鏡中常用的物投及其性能和用途
備注:倒置顯微鏡結(jié)構(gòu)文章屬中儀光科不得轉(zhuǎn)載http://www.cnnoptics.com/
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